喀斯特地区地表土壤稀少、岩石裸露率高, 碳酸盐岩体内常形成较大的溶缝、管道及不规则地下空间, 因此土层以下存在着大量发育的岩溶裂隙^[1]。在全球气候变暖的大背景下, 降雨格局正在发生改变。有研究表明西南喀斯特地区总降雨量基本不变, 但是年降雨日显著减少^[2], 降雨时间间隔会有延长, 而单次降雨量会有增大趋势^[3]。因此, 降雨格局的改变, 可能会进一步加剧岩溶裂隙生境的严酷性, 对植物生长产生负面影响。然而, 最近有研究指出, 赋存土壤的浅层岩溶裂隙可以成为供植物生长的生境^[4—5]。对于喀斯特植物, 旱季耗竭较慢的浅层岩溶裂隙中的水分可能是其主要利用来源^[6]。因此, 喀斯特岩溶裂隙是否会成为植物生长的有利空间, 该地区植物又如何适应岩溶裂隙生境及降雨格局的改变, 成为生态学工作者关注的问题。

对不同器官的生物量分配来调整是植物面对不断变化环境的适应策略之一。如水分与养分供应减少时, 植物往往通过增加对根系生物量的分配来提高对土壤资源的利用^[7]；而光照降低时, 植物通过增加对叶的生物量分配来提高对碳源的捕获速度。在喀斯特地区, 由于土壤资源先天不足, 加上岩溶裂隙产生水土漏失, 水分、养分明显成为植物生长的限制因子。根据最优分配理论^[8], 植物可能会增加对根系生物量的分配, 以提高对水、土资源的利用。如Hu等^[9]研究表明, 两个旱生物种都采取增大根冠比的策略来补偿碎石生境资源减少的逆境。另一方面, 降雨时间格局延长将加剧干旱, 如果岩溶裂隙能够为植物生长提供一定水分利用来源, 植物的向水性也可能促进其地下生物量的投资分配^[10]。

根系是植物吸收水分和养分的主要器官, 对植物生长发育和新陈代谢起着决定性的作用。根系形态和分布特征直接反映了植物对其立地条件的利用^[11], 以及在有限资源下的性状权衡^[12]。垂直向下往深处延伸是根在局部可利用养分区域内的拓展方式^[13], 但也有研究发现两种生长在上覆浅层土壤的岩溶生境中的物种, 其粗根以水平伸长为主^[14]。根系也会适应性地调整垂直方向上不同深度的根系分布比例以减轻环境对植物生长的影响^[15]。大多数植物的根都集中在浅层土壤中^[16], 根系生物量随深度的增加而降低^[11]。但由于岩溶生境中裂隙的存在, 浅土中的喀斯特植物可能增加紧挨基岩上方界面土层的根系生物量, 从而增加根系延伸到更深裂隙中的机会^{[6, 17—18]}。

前期研究表明, 在降雨间隔时间短, 降雨均匀充足时, 有少量的岩溶裂隙能够促进桢楠的生长和光合, 即岩溶裂隙确实能够提供可利用空间及资源以使植物良好生长, 但降雨间隔时间延长和岩溶裂隙层增加后, 裂隙的存在使植物生长逐渐受到抑制^[19]。由于陆生植物根系感知地下生境变化的第一性, 研究根系响应岩溶裂隙具有重要意义。同时, 研究植物的生物量分配是理解植物响应与适应生境变化的关键。因此, 本研究继续以两年生桢楠幼苗为研究材料, 模拟全土或上覆不同厚度土层的岩溶裂隙生境, 提出科学问题: 桢楠幼苗是否通过调整生物量分配和根系分布来适应喀斯特岩溶裂隙生境及降雨时间格局？并做出如下假设: (1)少量的岩溶裂隙生境并不影响桢楠幼苗的根系生长及生物量积累, 即岩溶裂隙能为桢楠幼苗提供一定的生长空间, 但裂隙为桢楠提供生境的能力随土层变薄与降雨时间格局延长而减弱；(2)桢楠幼苗通过增加根系生物量分配提高对土壤及水分资源的利用；(3)桢楠幼苗通过增加紧挨裂隙层界面土层中的根系分布提高对岩溶裂隙生境与延长降雨时间格局的适应。以期为喀斯特地区的植被恢复和楠木资源管理提供进一步的理论参考。

1 材料与方法 1.1 实验材料

实验材料为桢楠(Phoebe zhennan S. Lee)两年生幼苗。桢楠是樟科楠属的高大乔木, 是我国特有的珍贵用材树种, 天然林仅分布于重庆、四川、贵州等地^[20—21]。桢楠本喜弱酸性土壤, 但研究者在重庆大足和永川等喀斯特生境中发现了大片天然桢楠林, 这些桢楠成树几乎都能向深处扎根破岩, 稳健地生长在岩溶裂隙之中。因此, 推测其具有适应岩溶裂隙生境的生存对策。供试土壤为具有典型喀斯特地貌的重庆市中梁山黄色石灰土, 其理化性质^[19]如表 1。以喀斯特石灰石为供试石块。

1.2 实验方法

实验在重庆市西南大学生态园实验基地大棚(透明顶棚, 四周开放)(29°49′N, 106°25′E)内进行, 海拔225 m, 属亚热带季风气候。

为模拟喀斯特地区不同土层厚度的岩溶小生境, 在种植容器(长×宽×高: 54 cm×39 cm×24 cm)下层铺设不同厚度的喀斯特石块, 形成岩溶裂隙, 上层以喀斯特黄色石灰土覆盖。小生境分为3水平: 全土无岩溶裂隙生境(S₀: 24 cm土壤)、1/2岩溶裂隙生境(S_1/2: 12 cm土壤层+12 cm裂隙层)、3/4岩溶裂隙生境(S_3/4: 6 cm土壤层+18 cm裂隙层)。三种生境的总体积不变。容器底部留有小孔以供重力水流走。降雨时间格局分为两个水平: 短时间降雨格局(I_2d)和长时间降雨格局(I_19d)。I_2d为每隔2 d一次降雨, 根据重庆市平均降雨时间间隔将设置；I_19d为每隔19 d一次降雨, 根据重庆市年均最长连续无有效降水日设置^[22]。两种降雨处理总施水量保持一致, 每个季度总施水量一致, 短时降雨格局处理组各季度单次施水量依次为2.9 mm、14.5 mm、13.9 mm、5.4 mm降水, 长时降雨格局处理组各季度单次施水量依次为19 mm、96 mm、93 mm、36 mm降水, 实际施水量依容器的底面积计算得到^[19](表 2)。每个处理6个重复。因此, 实验为双因素6水平, 共36个处理。

实验于2019年7月15日选取生长状态良好、株高大约为50 cm的二年生桢楠幼苗进行移栽, 进行适应生长29 d后, 于8月14日开始水分处理, 处理353 d。

1.3 指标测定

于2020年8月1日分根、茎、叶进行收获。茎、叶擦拭干净后放入信封, 并在烘箱中70℃烘干至恒重, 于干燥冷却器中冷却至室温后称取干重。根系采取分层收获的方法, 从上至下每6 cm取一层, 共取四层。将取出的土壤倒入孔径1 mm筛中, 用流水冲洗并挑出根系, 装入自封袋, 做好标记带回实验室。用数字化扫描仪(STD1600 Epson USA)扫描获得桢楠根长、根表面积、根体积等指标, 根系总长度、总表面积和总体积分别为各层根长、根表面积、根体积之和。随后将根系烘干称重。总生物量为根、茎、叶生物量之和。根生物量占比=根系生物量/总生物量；茎生物量占比=茎生物量/总生物量；叶生物量占比=叶生物量/总生物量；每层根系生物量占比=某一层的生物量/根系总生物量。

1.4 数据分析

采用SPSS 22.0软件进行双因素方差分析, 揭示岩溶裂隙生境、降雨时间格局以及生境与降雨时间格局的交互作用对桢楠幼苗的根系指标的影响；采用t检验分析相同小生境下的降雨时间格局效应；采用单因素方差分析结合多重比较(LSD)分析相同降雨时间格局下的小生境效应。用Origin 8.6对每个指标进行作图。

2 结果 2.1 总生物量积累及在各器官间的分配

在两种降雨时间格局下, 桢楠的总生物量均随着土壤的减少(岩溶裂隙的增加)而呈减少趋势, 在I_19d条件下减少的幅度更大。除S₀生境外, 桢楠总生物量随着降雨时间间隔延长显著减小(图 1)。

在两种降雨时间格局下, 桢楠的叶、茎和根各器官生物量占比随着土壤的减少(岩溶裂隙的增加)整体上发生了较为一致的变化: 即桢楠的叶生物量占比随着土壤的减少(岩溶裂隙的增加)保持不变(I_2d)或增大(I_19d), 茎生物量占比在S_3/4生境中减少, 根生物量占比在S_3/4生境中有增大趋势(图 1)。

随着降雨时间间隔延长, 不同生境下桢楠的茎生物量占比均显著下降, 根生物量占比不变, 而叶生物量占比保持不变或者增大(图 1)。

双因素方差分析表明: 生境和降雨时间格局处理对桢楠总生物量及叶生物量占比产生了显著交互作用(表 3)。

2.2 根系生物量积累及在不同深度间的分配

I_2d条件下, 桢楠的根系生物量在三种不同小生境中无显著性差异, 但在I_19d条件下, 桢楠的根系生物量随着土壤的减少(岩溶裂隙的增加)而呈减少趋势。在S₀生境中, 两种降雨时间格局对桢楠根系生物量无显著影响, 但在S_1/2和S_3/4生境中, 桢楠根系生物量随着降雨时间间隔延长显著减小(图 2)。

两种降雨时间格局下, 根系生物量占比总体上均随着土层的加深而逐渐降低。但在S_1/2生境中, 两种降雨时间格局下的第二层(D_6—12, 岩溶裂隙层上的土壤层)根系生物量占比显著增加(与S₀生境相比), 且在I_19d条件下增加更显著；在S_3/4生境中, 两种降雨时间格局下的第一层(D_0—6, 岩溶裂隙层上的土壤层)根系生物量占比又逐渐回升(与S_1/2生境相比), 且在I_19d条件下回升更显著(图 2)。

双因素方差分析表明, 降雨时间格局和生境处理对桢楠幼苗根系生物量、D_12—18的根系生物量占比产生了显著交互作用(表 4)。

2.3 根系形态特征

I_2d条件下, 桢楠根系的总根长、总根表面积和总根体积在三种小生境中并无显著性差异；I_19d条件下, 桢楠的总根长、根表面积和根体积随着土壤的减少(岩溶裂隙的增加)而呈减少趋势(图 3)。在S₀和S_1/2生境中, 桢楠的总根长、总根表面积和总根体积在两种降雨时间间隔下均无显著差异；但在S_1/2生境中, I_19d条件下的根表面积相较于I_2d显著减小了25.14%, 根体积显著减小了26.86%；在S_3/4生境中, I_19d的根长相较于I_2d显著减小了44.08%, 根表面积显著减小了46.44%, 根体积显著减小了49.08%(图 3)。

双因素方差分析结果表明: 降雨时间格局和生境处理对桢楠幼苗的根长、根表面积以及根体积均有显著的交互作用(表 5)。

3 讨论 3.1 岩溶裂隙对桢楠幼苗生长的影响依赖于裂隙上层土壤厚度及短时降雨间隔

在2 d降雨时间间隔下, 与全土S₀生境相比, S_3/4生境显著降低了桢楠幼苗的生物量, 即土层厚度极度变薄而岩溶裂隙层大量增厚后, 使其涵养的水、养资源缺乏^[23], 抑制了桢楠幼苗的生长^[19]。然而, 少量岩溶裂隙存在(即S_1/2生境)并没有对桢楠幼苗的总生物量产生影响；同时, 根系生物量及根系的根长、根表面积等生长指标也都未受到负面影响。可见, 少量的岩溶裂隙确实可以为植物提供一定的生境, 裂隙中截留的土壤资源能够促进或者不抑制植物的生长^[19]。只是随着处理时间的延长, 这种生境供植物生长的能力有减弱的趋势。这体现在处理3个月后的桢楠幼苗净光合速率在1/2岩溶裂隙生境中高于全土生境^[19], 而本研究中处理12个月后的桢楠幼苗生物量在1/2岩溶裂隙生境与全土生境中无显著差异。延长降雨时间间隔后(I_19d), 单次降雨强度急剧增大, 岩溶裂隙的存在增加了水、土流失的速度和程度^[24], 同时, 也亦形成“骤湿突干”的干湿交替生境, 一次性大量的降水仅会短暂性地为植株提供充足的水分, 但在后期, 水分会持续的蒸发和被根系消耗又得不到及时补充, 导致干旱胁迫加重, 从而限制了桢楠幼苗的生长, 且随着土层厚度的降低即岩溶裂隙层的增厚, 这种限制作用更加明显。

另外, 本研究发现在全土无裂隙生境中, 降雨时间格局的改变对桢楠生物量积累及根系生长没有影响。这可能与全土生境土层深厚、土壤蓄水能力较强有关。前期研究的土壤含水量数据显示, 在I_2d条件下, 全土生境中一个施水周期内的土壤含水量在23%—26%之间变动, 而在I_19d条件下, 全土生境中一个施水周期内的土壤含水量仍然可维持在22%—32%^[19]。全土生境中含水量的这种表现很可能是由于喀斯特土壤较为黏重的特性。

3.2 桢楠幼苗通过调整生物量分配适应岩溶裂隙生境和延长的降雨时间格局

生物量分配策略是植物内在的发育过程适应所在环境条件的结果^[25]。在本研究中, 短时间降雨间隔下, 与全土生境相比, 3/4岩溶裂隙生境由于土壤总量减少而岩溶裂隙增加, 土壤水分、土壤养分和生存空间降低, 成为限制根系生长的主要因素, 因而桢楠幼苗通过减少茎生物量分配比例, 增大了根系生物量投入比例来适应土壤资源及生存空间下降的不利生境。这与杨小琴等^[26]对千根草(Euphorbia thymifolia)的研究一致, 均符合最优化分配理论所描述的植物倾向于将资源分配到资源最受限制的器官^[8]。短时降雨间隔下, 1/2岩溶裂隙生境中, 由于岩溶裂隙赋存土壤并提供根系拓展空间供以桢楠幼苗正常生长, 各器官生物量分配与总生物量趋势一致, 均相对全土生境中无显著变化。长时间降雨间隔下, 与全土生境相比, 裂隙存在尤其是大量裂隙存在时, 桢楠幼苗仍然增加根系生物量的分配, 以获取土壤中更加缺少的水分与养分^[27]。然而, 除了增加根系生物量分配外, 桢楠幼苗还增加了叶的投入, 当然是以牺牲茎的生物量分配为代价。前期研究也表明在长时间降雨间隔下, 大量岩溶裂隙生境严重抑制了桢楠的净光合速率^[19]。可见, 在这种严酷条件下, 桢楠也不得不尽可能地增大叶片来增加叶片碳水化合物的供应, 从而维持自身一定的光合和生长^[28]。另一方面, 桢楠为木本植物, 木质部较草本植物发达, 导管输送水分和无机盐的能力较高, 且导管在水分胁迫下保水性较好^[29], 适当削弱茎的投入不会造成水盐运输障碍。所以在资源相对亏缺的情况下, 桢楠选择将生物量更多地分配给能够获取资源的器官(根和叶), 而非主要起运输和支持作用的器官(茎)。

不管是全土生境, 还是两种岩溶裂隙生境, 根系生物量分配在两种降雨格局处理间均无显著差异。因此, 本研究中, 在生境固定的情况下, 桢楠在应对降雨时间格局延长且单次降雨强度变大的情况时, 并没有采取预期的增加根系生物量分配的策略, 而是采取了牺牲茎的投入, 增大光合器官叶的投入策略, 其原因还需要进一步的研究。

3.3 桢楠幼苗通过改变根系垂直分布策略提高对资源的获取能力

喀斯特地区土壤异质性高, 植物会通过调整根系空间分布与功能性状以适应不同的生境^[30]。在2 d降雨时间间隔下, 根系生长(包括根长、根表面积、根体积及根生物量)总体上不受土层变薄(岩溶裂隙增厚)的影响, 但延长降雨间隔后, 虽然一次性降水十分充沛, 但由于裂隙渗漏及土层水分蒸发等因素^[31], 在一个20 d的施水周期中, 含裂隙的生境中的土壤含水量有13 d显著低于全土生境^[19], 桢楠根系生长因此受到显著限制。但两种降雨格局下, 根系的垂直分布具有一致性, 均随着生境深度的增加呈下降趋势。然而, 在两种岩溶裂隙生境中根系的拓展策略发生了改变, 且改变主要体现在增加了岩溶裂隙层之上土壤层, 即S_1/2生境中的第二层(D_6—12)和S_3/4生境中的第一层(D_0—6)根系生物量的分配。有研究表明, 植物根系在生长过程中遇到难以穿透的机械障碍时, 会降低自身的向地感应, 沿障碍物表面生长^[32]。并且在水分亏缺的情况下, 桢楠这类喀斯特适生植物对于感知土层与裂隙层交界带区域水分可用性的变化更为敏感^[30], 桢楠选择了增大在交界区土层的生物量比例, 从而整体上削弱了岩溶裂隙中水分、养分缺乏对桢楠的影响, 保证桢楠最大化地利用有限的土壤资源。桢楠增加岩溶裂隙上方界面土层的根系生物量后, 能够增大根系向裂隙中拓展的机会^{[6, 17—18]}, 倘若本研究处理时间更长久, 桢楠根系对岩溶生境的适应极可能有更佳表现。

总之, 赋存土壤且为根系提供穿窜空间的岩溶裂隙能成为植物幼苗赖以生存的生境, 但裂隙供幼苗良好生长的能力依赖于上覆适当厚度的土层及较短的降雨间隔, 随着处理时间延长也会降低。随着生境严酷程度增加(土层变薄及降雨时间间隔的延长), 桢楠幼苗选择牺牲对茎生物量的分配而提高对根系和叶片的生物量投入, 同时增加裂隙层上方界面土层中的根系分布来保证最大化地利用有限土壤资源, 从而适应喀斯特的岩溶裂隙(及干旱)生境。