我国茶园面积已达260万 hm²，约占世界茶园面积57%。茶蚜Toxoptera aurantiiBoyer是茶树重要害虫之一，广泛分布于全国茶区。其成、若蚜具有显著的趋嫩为害习性，刺吸茶树嫩芽、嫩叶和嫩茎，致芽头弯曲、叶片卷曲、嫩茎细弱，还分泌“蜜露”致芽叶粘连；“蜜露”落于茶树中、下层叶面上引发茶煤病，影响茶树光合作用。遭受蚜害之后，茶梢生长停滞以至于枯萎，以蚜害茶梢制成的商品茶叶质量劣变。据浙江省“安吉白茶”产区农技部门多年经验测算，茶蚜重度发生的茶园，蚜害可致当季茶叶产值下降20%—30%，还导致下一个季节树势衰竭、减产减值。生长季节茶蚜蚜群中的个体大多数是无翅胎生雌蚜，少数是有翅胎生雌蚜，群聚于茶梢上刺吸汁液、分泌蜜露。茶梢是加工名优茶的原料，不便施用农药治蚜。大草蛉Chrysopa septempunctata Wesmael是茶蚜的主要天敌之一，而在通常情况下不足以控制该蚜。如果使用信息物质诱集和指引大草蛉寻觅并捕食茶蚜，则可提高搜寻效率和捕食效果。多年来的研究已肯定虫害之后植株释放挥发性互利素招引天敌昆虫，害虫分泌物和残留物含有引诱天敌的利它素。本课题组也发现：被茶蚜为害的茶树品种龙井43的茶梢挥发物中苯甲醛含量显著增加、反-2-己烯醛和吲哚的含量明显增加，苯甲醛和反-2-己烯醛引起中华草蛉Chrysopa sinica(Tjeder) 强烈的触角电生理(EAG)反应以及风洞中向上风飞行行为^[1]；茶蚜气味、茶蚜体表的正己烷或乙醚漂洗物、茶蚜蜜露中都含有强烈引起中华草蛉EAG反应的利它素^[2]。未探讨在茶园开放环境中，这些信息物质是否能够有效调控大草蛉行为？还有一些研究揭示：雌成蚜释放的性信息素包含(4aS,7S,7aR)-nepetalactone 和(1R,4aS,7S,7aR)-nepetalactol 两种成分，二者通常以不同比例、或以某个单一成分出现于某个蚜虫种内^{[3, 4, 5, 6, 7]}；这两种蚜虫性信息素引诱某些种类的蚜虫天敌，比如，草蛉Chrysopa cognateWesmael^[8]、蚜虫的寄生蜂^{[9, 10]}；而且，合成的nepetalactone 与从荆芥植株提取的天然nepetalactone 对于寄生蜂的引诱活性无差异^[11]。本组已鉴定茶蚜性信息素含有(4aS,7S,7aR)-nepetalactone和 (1R,4aS,7S,7aR)-nepetalactol,二者比例为 4.3—4.9:1^[12]。

既然茶梢互利素引诱中华草蛉，蚜虫性信息素对于某些草蛉类和寄生蜂类也有强烈引诱效应，那么可否将这两类信息物质按适宜的比例组合起来制成诱集剂，用于诱集大草蛉而强化对于茶蚜的制约效应？本研究拟分离鉴定茶树良种龙井长叶Camellia sinensis cv. Longjingchangye的茶梢互利素，检测茶梢互利素单组分、蚜虫性信息素、以及茶互利素和蚜性信息素的混合物调控大草蛉行为的效应，筛选出诱效最强的信息物质单组分或混合物作为大草蛉诱集剂，并研讨其诱集大草蛉制约茶蚜技术。

春茶期间从中国农业科学院茶叶研究所试验茶园采集茶蚜于实验室内饲养。春茶后期于浙江省杭州市梅家坞村的山林中选一片未有茶蚜为害、面积约0.2 hm²的有机茶园，定2株相距50 m的茶树。将室内饲养的1000头茶蚜(其中约95%是无翅蚜、5%是有翅蚜)轻轻接于其中1棵茶树的6支健康茶梢上，接着用纱网罩住这6支茶梢以防茶蚜逃逸。待茶蚜取食24 h 之后，剪下这6支蚜害茶梢，用小刷子缓缓移除茶梢上的茶蚜及其蜕皮，称量，总质量15.5g。用浸蒸馏水的脱脂棉包裹茶梢基部以保湿，立刻用于收集挥发物。同时剪下选定的另1株茶树上的6支健康茶梢，称量，总质量也是15.5 g，梢基部同法保湿，收集挥发物。茶树品种为龙井长叶，茶树树龄20年，茶树高95 cm，茶行行距1.5 m，同一行的茶树株距33 cm。

使用Mu等^[13] 的“推-拉式”空气夹带吸附装置，其主体部件是一个直径10 cm、体积10 L的玻璃圆柱体，组成圆柱体的两部分以磨砂口紧密结合，旋开，分别放入健康茶梢、蚜害茶梢，再拧紧。圆柱体的两端分别具有进气口、出气口。由进气口通入已过滤的洁净空气，流量为100 mL/min，出气口依次连接Super Q(80 mg)吸附柱、流量计和抽气泵。出气口的流量稍小于进气口气流量，以保证通入的洁净空气充盈圆柱体、阻抑周围未过滤气体的进入。抽气1 h后，取下吸附柱，用300 μL色谱纯二氯甲烷淋洗，淋洗液接入体积1500 μL的贮样瓶中，加入10^-4 g/mL的癸酸乙酯1 μL作为内标，摇匀。用微量进样器吸取1 μL进GC-MS分析。

仪器型号为Agilent GC(6890N)-MS(5975B)。色谱柱为30.0 m(长)×250 μm(直径)×0.25 μm (膜厚) id HP-5MS石英毛细管柱；不分流进样；恒定流量，流量为1.0 mL/min；溶剂延迟3 min；进样口温度250℃；GC/MS接口温度280℃；程序升温其柱温50—190℃，起始50℃，保持5 min，再以3℃/min 速度升至190℃，保持5 min。EI离子源，电离能70 eV。使用全扫描，扫描频率为2次/s。载气为99.999%的氦气。

定性分析方法：根据样品中组分峰的保留时间与可信的合成化合物峰的保留时间一致性、样品中组分峰的质谱图与化学工作站标准化合物质谱图的匹配度、新鲜茶梢挥发性化合物文献^{[2, 14, 15, 16]}。定量分析方法：GC上样品中组分峰的面积与内标峰面积的相对比值。

从蚜害茶梢挥发物中鉴定了21种化合物(图 1,表 2)，除去4种烷烃类和1种未知组分，其余16种化合物用作供试味源。这16种供试化合物购自Sigma-Aldrich公司或东京化成公司(Tokyo Chemical Industry Co.,LTD)，纯度均为色谱纯(≥ 98%)；荆芥内酯和荆芥醇由美国Rescue昆虫信息素公司提供，纯度 ≥ 99%；将α-法尼烯、苯甲醛和荆芥醇按2:2:6比例配成混合物。这19种味源的剂量都是10 μg /μL。正己烷为溶剂。

秋季从茶园中收集大草蛉幼虫回室内用茶蚜饲养，选取同一批羽化的大草蛉成虫作为试虫。

昆虫触角电位仪购自Syntech公司，采用Han和Chen^[2]的测试方法。用虹膜剪刀从每头草蛉左侧触角基剪下触角，从触角基部插入参考电极，触角端部减去少许，套入记录电极内，注入电生理盐水。先用正己烷测试，校准EAG反应值为0，再用味源刺激。分别吸取每种味源20μL均匀滴在6 cm×0.5 cm滤纸条上，放入刺激管，刺激管尖端连接气体刺激装置，刺激气体流量20 mL/min。每次味源刺激时间是0.5 s，两次味源刺激之间的间隔为2 min，以便空气刺激控制器 (Model CS-05b,Syntech) 提供洁净湿润空气以带走供试触角周围的气味、以及触角恢复常态。安置昆虫触角电位仪的实验室装有换气扇，以排除室内气味。每种味源检测10根触角。得到的EAG信号经放大器 (Syntech CS-05) 放大后展示于示波器上，经Syntech软件转换后贮存于计算机中供统计分析。

14种供试信息物质的组成如表 1的Ⅰ—ⅩⅣ号，每个诱芯上载的每种信息物质中含有的混合物或单组分的剂量都是10 mg。分别将Ⅰ—ⅩⅣ号的10 mg信息物质和1 mg 2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(butylated hydroxytoluene，常用缩写BHT，作为抗氧化剂)加入90 μL正己烷中，混匀，载于1条4.5 cm(长)×1.5 cm(宽)×1.0 cm(厚)的羊毛毡上，以聚氯乙烯塑料膜封闭，即制成1个诱芯。贮于-20℃的冰箱内备用。

从北京中捷四方生物科技有限公司购置三角形诱捕器，诱捕器白色，长20 cm。在每个诱捕器内悬挂1个诱芯，诱芯距底板1 cm，底板均匀涂布无色无味昆虫胶，用于诱捕茶园大草蛉以比较诱芯之间的诱效差异。

在2012年秋季于皖南安徽省敬亭山茶场选4块面积1 hm²左右的有机茶园，分别用于4次诱捕试验，即10月3—5日、10月27—29日、10月30—11月1日、11月2—4日。每次诱捕试验设6个组，每组包括表 1的14种诱芯，在每个组内14个三角形诱捕器呈线型排列、间距10 m，组间距离30 m，每种诱芯重复6次。每次试验历时3日，统计每种诱芯捕获的大草蛉总数，选用效果最佳者作为大草蛉诱集剂。

将“1.3.2”筛选的大草蛉诱集剂按“1.3.1”的方法制成诱芯，于2012年10月31日放置于安徽省敬亭山茶场的一片0.5 hm²无公害茶园中。诱芯挂于茶梢上，间距8 m×8 m。另选1 km之外一块0.5 hm²无公害茶园作为CK区，不放置诱芯。在诱集区和CK区分别用平行跳跃法选10个样方，每样方为15米茶行，统计每样方内茶梢上茶蚜数量 ≥ 20头的有蚜茶梢数。2013年3月10日，同法调查诱集区和CK区有蚜茶梢数，计算诱集区和CK区有蚜茶梢数下降率、诱集区校正有蚜茶梢数下降率即防治效果。

2012年11月14日，在苏南丹阳市江苏吟春碧芽股份有限公司选相互间距0.5 km的3块无公害茶园，其中的一块作为大草蛉诱集区，参照“1.4.1”同法放置诱芯；第2块为不放置诱芯的CK区；第3块放置40 cm×20 cm无粘性芽绿色板，色板的亮度L是69.27，色板的色度坐标a是36.76、色度坐标b是59.17^[17]，色板附于小竹竿上，下底边与茶梢等高，色板间距8 m×8 m，诱集大草蛉。

参照“1.4.1”，11月14日同法在3块茶园调查有蚜茶梢数。翌年3月10日，同法调查诱集剂诱集区、无粘性芽绿色板诱集区和CK区的有蚜茶梢数，分别计算诱集剂诱集区、芽绿色板区和CK区的有蚜茶梢数量下降率，以及诱集剂诱集区、无粘性芽绿色板诱集区校正有蚜茶梢数下降率。

2 013年11月15日在浙江省松阳县新兴镇选一大片有机茶园。这片有机茶园位于一个山坡上，坡度约10°，稀疏地间种杨梅、桂花等经济林木，经济林木高2.5—3.5 m。蚜害茶梢的密度较大，大草蛉在茶行间飞翔。选其中0.5 hm²区域为诱集剂试验区，500 m 之外再选一片0.5 hm²区域为CK区。参照“1.4.1”，同法放置诱芯；2014年3月5日同法调查有蚜茶梢数并作统计分析。

2014年3月25日选杭州市农业科学研究院茶叶研究所一大片3年生—4年生未投产茶园，其中0.5 hm²区域为诱集剂试验区，500 m 之外的另一片0.5 hm²区域为CK区。参照“1.4.1”，同法放置诱芯；2014年4月25日同法调查有蚜茶梢数量并分析。

从蚜害茶梢挥发物中鉴定了21种成分(图 1，表 2)，从健康茶梢挥发物中鉴定了16种成分(图 2，表 2)。二者相比较，发现蚜害之后：① 组分增加；②各个挥发性成分之间的相对含量发生变化；③ α-法尼烯、苯甲醛和E-2-戊烯醛的含量显著增大。

图1 蚜害茶梢挥发物总离子流色谱图 Fig.1 Chromatography of total ion flow of volatiles from tea aphid-damaged tea shoots

图选项

图2 健康茶梢挥发物总离子流色谱图 Fig.2 Chromatography of total ion flow of volatiles from intact tea shoots

图选项

源于茶蚜为害茶梢挥发物的α-法尼烯、苯甲醛和 (E)-2-戊烯醛引起大草蛉强烈的EAG反应(图 3)，本研究称三者为茶树互利素。茶蚜性信息素荆芥内酯和荆芥醇也能引起强烈的EAG反应，荆芥醇的EAG反应值大于其它17种供试的单组分的EAG值。苯甲醛、α-法尼烯和荆芥醇混合物引起的EAG反应值最大(图 3)。

图3 蚜害茶梢挥发物多种组分和蚜虫性信息素及两者组成的一种混合物引起大草蛉的EAG反应 Fig.3 Electroantennogram values of Chrysopa septempunctata elicited by various volatile components from tea aphid-damaged tea shoots and tea aphid sex pheromones as well as a mixture composed of the both types of pheromones 1: (E)-2-pentenal; 2: (E)-2-hexenal; 3: (Z)-3-hexen-1-ol; 4: benzaldehyde; 5: (Z)-3-hexenyl acetate; 6: 2-ethyl-1-hexanol; 7: (E)-ocimene; 8: acetophenone; 9: linalool; 10: nonanol; 12: (Z)-butanoic acid,3-hexenyl ester; 13: decanal; 15: phytol; 17: copaene; 19: α-farnesene; 20: cedrene; 22: lactone; 23: lactol; 24: a mixture composed of benzaldehyde,α-farnesene and lactol

图选项

由α-法尼烯、苯甲醛和荆芥醇按2:2:6组成的混合物对大草蛉的诱效最强，表明茶树互利素和蚜虫性信息素互相增效，本研究称之为大草蛉诱集剂。其次，当荆芥内酯和荆芥醇比例为1:9或0:10时，亦即荆芥醇对于大草蛉有较强诱效。再次，单组分蚜虫性信息素的引诱活性强于单组分茶树互利素，茶树互利素中以α-法尼烯诱效最强(表 3)。

10—11月大草蛉数量较多，茶园诱集试验证实：大草蛉诱集剂有效地将其诱向茶蚜蚜群而直接捕食；诱来的大草蛉还在蚜群附近产卵，卵孵化为幼虫越冬，翌年春茶季节就近捕食茶蚜越冬卵孵化的若蚜和成蚜(表 4—表 6)。

2014年春茶期间杭州茶区和邻近的安吉白茶茶区茶蚜大发生，开始阶段生产茶园危害重，之后未开采的幼龄茶园也受到较重为害。在幼龄茶园中使用诱集剂诱集大草蛉，可诱来大草蛉而在一定程度上制约茶蚜(表 7)。

大草蛉是茶蚜的主要天敌之一，也捕食其它昆虫的卵和幼虫^[18]，是茶园中的重要天敌，本文沿用其学名Chrysopa septempunctata Wesmael^[18]，有些文献用学名Chrysopa pallens (Rambur)^[19]。在虫害的诱导下，植物释放挥发性互利素以引诱天敌；人们在田间也常常嗅到严重遭受虫害的植株气味的异变，发现较多的天敌随着被招引来捕食或寄生害虫。实践中也发现：在空旷的田野中，使用合成的一种互利素或者几种互利素的混合物很难诱来大量天敌，成功的例证甚少。尚未见茶园中应用茶树互利素引诱草蛉类天敌昆虫防治茶蚜的报道。Boo等首次报道了蚜虫性信息素强烈地引诱草蛉Chrysopa cognateWesmael^[8]。Koczor 等发现蚜虫性信息素强烈吸引大草蛉Chrysopa pallens (Rambur)，蚜虫性信息素与植物气味的混合物同样吸引大草蛉C. pallens (Rambur)^[19]。本研究也证实荆芥醇、荆芥内酯及二者混合物强烈地引诱大草蛉；而且，茶蚜性信息素与寄主植物茶树挥发物α-法尼烯、苯甲醛的组合也强烈地引诱大草蛉。但是，现阶段仅用蚜虫性信息素引诱大草蛉防治茶蚜是不可行的，因为在茶园环境中其诱效有限且合成成本高昂。

近年来Socorro等提出“super-blending”理念^[20]，这类“super-blending”对于目标昆虫引诱力很强，其成分来自于多种植物，这些植物可能属于一个或几个科。基于这种理念，他们研制出棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner) 引诱剂的系列产品和引诱技术并付诸实施^{[20, 21, 22]}。本课题组发现寄主植物茶树挥发性利它素引诱假眼小绿叶蝉Empoasca vitis Göthe^[12]，还发现茶园杂草迷迭香挥发物中一些成分也显著引诱假眼小绿叶蝉^[23]，茶树和迷迭香显然不属于同一个科。本研究则将源自茶树的α-法尼烯、苯甲醛和来自蚜虫的荆芥醇按一定比例组成混合物，这种混合物在室内引起大草蛉强烈的EAG反应，在田间展示出对于大草蛉的显著引诱力，可用于茶园中治理茶蚜。这种研发思路与Socorro等^{[20, 21, 22]} 研发高效、实用的引诱剂理念类似，也证明了高效引诱剂的组分可以源自不同种类的寄主植物或昆虫。

色彩、形状和尺寸等可视因素对于昆虫也有一定引诱力^{[24, 25]}。油菜花黄色板与茶梢挥发性利它素组合，可显著增强茶梢挥发性利它素引诱茶蚜的效果^[26]；淡黄绿色板与茶梢挥发性利它素组合，能够显著增强茶梢利它素引诱假眼小绿叶蝉的效果^[12]。本研究的芽绿色彩吸引大草蛉，可将大草蛉诱集剂与芽绿色彩叠加起来而强化诱效。还可以采用相关的措施以提高诱效。比如，深秋时节诱来的大草蛉除了直接捕食茶蚜之外，还会在蚜群中产卵，卵孵化为幼虫，以幼虫在茶园中越冬，翌年春季就近捕食由越冬蚜卵孵化的茶蚜。春茶季节农事繁忙，顾不上治蚜，也不允许施药，如此诱集大草蛉治理茶蚜可谓一举多得，本研究探讨出一个应用天敌诱集剂控制茶蚜的途径。

但是，无论在皖南、苏南和浙西南茶园的越冬期间诱集大草蛉治蚜，还是在杭州郊区春茶中后期诱集大草蛉控制茶蚜，本诱集剂的防治效果只有40%左右。供试茶园是有机茶园或较少施用化学农药的无公害茶园，其中大草蛉密度明显大于普通茶园；而且，实际观察发现，这种诱集剂还诱来部分丽草蛉Chrysopa formosa Branar，与大草蛉一起捕食了茶蚜。因此，为了提升防治效果，还需要不断改进配方和使用技术以增强诱效。秋季的茶园中需要节制施药而保护天敌昆虫，以便茶园群落中栖息较多的草蛉类天敌。

表 4和表 5中CK区比诱集剂区的有蚜茶梢数稍小、而表 6和表 7中CK区比诱集剂区的有蚜茶梢数稍大，这些试验区都是随机选取的，对于试验结果的可靠度没有影响，防效都在40%上下。表 7展示了幼龄茶园实验结果，由于茶蚜基数较高，防效只达到37.5%，害虫密度也影响着防效。