文章信息
- 朱金方, 刘京涛, 陆兆华, 夏江宝, 柳海宁, 金悦
- ZHU Jinfang, LIU Jingtao, LU Zhaohua, XIA Jiangbao, LIU Haining, JIN Yue
- 盐胁迫对中国柽柳幼苗生理特性的影响
- Effects of salt stress on physiological characteristics of Tamarix chinensis Lour. seedlings
- 生态学报, 2015, 35(15): 5140-5146
- Acta Ecologica Sinica, 2015, 35(15): 5140-5146
- http://dx.doi.org/10.5846/stxb201312182981
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文章历史
- 收稿日期:2013-12-18
- 网络出版日期:2014-09-25
2. 滨州学院山东省黄河三角洲生态环境重点实验室, 滨州 256603
2. Binzhou University, Shandong Provincial Key Laboratory of Eco-Environmental Science for Yellow River Delta, Binzhou 256603, China
土壤盐渍化对全球农业可持续发展和环境质量产生重要影响。据估计,全世界由于盐渍化造成灌溉区作物的损失高达110亿美元,并在不断增加[1]。土壤盐渍化是由自然或人类活动引起的一种主要环境风险,目前,全世界有10亿多hm2的土地处于盐渍化状态,占陆地总面积的30%[2]。根据农业部组织的第二次全国普查资料统计,中国盐渍土总面积约3600万hm2,占全国可利用土地面积的4.88%,耕地中盐渍化面积达到920.9万hm2,占全国耕地面积6.62%[3]。盐渍土分布面积广,主要分布在西北、华北、东北和沿海地区。土壤盐渍化会造成土壤溶液的渗透压增大,土体通气性、透水性变差,养分有效性降低,植物不能正常生长,使得地表植被群落退化[4]。因此,土壤盐渍化成为许多生态学家研究的一个热点问题[5, 6, 7, 8]。
在渤海南岸的昌邑国家海洋生态特别保护区,主要以保护中国柽柳(Tamarix chinensis Lour.)为主的滨海湿地生态系统,是中国唯一以柽柳为主要保护对象的国家海洋生态保护区。近年来,由于全球气候变化气温升高,该地区蒸发量增大,另外人类对地下卤水资源的过度开采使得海水倒灌,造成保护区内土壤盐渍化加重,柽柳林生态系统稳定性降低[9]。目前,国内对于柽柳的研究比较多,主要包括柽柳的形态学和分类学研究[10]、耐盐旱机制研究[11, 12]、生态学特性研究[13]以及细胞遗传研究[14]等方面。而国外对柽柳的研究常常把柽柳作为一种外来入侵种,研究其对生态系统的作用过程[15, 16]。对于刚毛柽柳[17]、甘蒙柽柳[18]以及多枝柽柳[12]等物种在盐胁迫下生理特性已有研究,而对于中国柽柳在盐胁迫条件下生理特性变化的研究较少。本研究在扦插实验基础上对中国柽柳的叶绿素含量(Chl)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性以及丙二醛(MDA)含量等生理指标进行测定,研究中国柽柳对盐分胁迫的适应机制,为莱州湾地区滨海柽柳林生态系统的保护和修复提供一定的理论基础。
1 材料和方法 1.1 材料和处理方法扦插枝条取自昌邑国家海洋生态特别保护区天然柽柳林,在2月中旬左右(柽柳萌动之前),剪取直径为1cm左右的1年生枝条,每15cm为一截,基部斜削,顶部平齐。用浓度为100mg/L的生根粉(ABT1号)浸泡基部(2—3cm)24h,然后扦插到不同盐梯度土壤的盆钵中,每盆10株,每个处理3个重复,共21盆,210株。用NaCl溶液模拟不同盐分浓度,盐分梯度设置为0.4%、0.8%、1.2%、1.6%、2.0%、2.4% NaCl溶液,以含盐量为0.02%的土壤作为空白对照,用相应浓度的NaCl溶液多次透灌,土壤达到相应的含盐量为止。盆钵底部设有托盘,深度为8cm,渗漏水分倒回盆钵并清洗托盘,清洗水也倒入盆钵,防止盐分流失。扦插实验期间每天喷洒2次,保持土壤含水量在15%—20%。实验进行60d后进行实验室测定。
1.2 测定指标及方法每盆随机取3株分别取每株柽柳相同部位正常生长的成熟叶片进行生理生化指标的测定,每个处理每次取3盆。光合色素含量测定以鲜重为单位,采用乙醇、丙酮浸泡法[19];SOD活性用氮蓝四唑光化还原法测定[20];POD活性用愈创木酚比色法测定[21];MDA的测定采用TBA比色法[22]。各项指标测定时,每个处理设3次重复,取平均值。
1.3 数据处理通过Excel对实验数据进行计算和处理,采用SPSS17.0统计软件利用单因素方差分析(ANOVA)对实验数据差异性进行显著性分析。
2 结果与分析 2.1 盐分胁迫对中国柽柳扦插穗成活率的影响从图 1可以看出,盐胁迫对柽柳扦插穗成活率的影响显著。在对照组(CK)中柽柳扦插成活率为100%;在含盐量0.4%的土壤中,柽柳扦插穗成活率降低,但与CK差异不显著(P>0.05)。在含盐量0.8%的土壤中,柽柳扦插穗成活率为76.7%,与CK相比显著降低(P<0.05)。随土壤含盐量的升高,柽柳扦插穗成活率显著降低,在含盐量为1.2%的土壤中,柽柳扦插穗成活率降为30%;而在含盐量为1.6%和2.0%的土壤中,扦插穗成活率均不足10%。当土壤含盐量为2.4%时,柽柳扦插穗成活率为0,已无法成功进行扦插繁殖。在低含盐量条件下,中国柽柳扦插成活率与CK之间没有显著差异,具有较高的成活率,表明中国柽柳具有一定的耐盐性。而随着盐胁迫增强,中国柽柳扦插穗成活率较低甚至无法成活,表明中国柽柳扦插穗受到盐胁迫伤害越来越大,严重影响根系的正常生长。
2.2 盐分胁迫对中国柽柳扦插幼苗叶绿素含量的影响随土壤含盐量的增加,柽柳幼苗叶片中叶绿素a(Chla)、叶绿素b(Chlb)、总叶绿素(ChlT)含量均呈先降低后升高再降低趋势(图 2)。在含盐量为0.4%土壤中,柽柳幼苗叶片中Chla、Chlb、ChlT含量分别相对CK降低13.8%、13.0%、13.6%,降低水平显著(P<0.05)。含盐量为0.8%时,叶片中Chla、Chlb、ChlT含量与含盐量为0.4%时的含量相比,均显著升高,与CK相比差异不显著(P>0.05),Chlb含量在该含盐量下达到最高值。在含盐量为1.2%时,柽柳扦插幼苗叶片中Chla、ChlT含量仍保持升高趋势并达到最大值,相对CK分别升高3.8%、3.4%,但与CK差异不显著(P>0.05),Chlb含量在该含盐量下开始降低。在含盐量为1.6%时,与含盐量1.2%相比,柽柳幼苗叶片中Chla、Chlb、ChlT含量均显著降低,但与CK差异均不显著。随着土壤含盐量的继续升高,Chla含量呈下降趋势,Chlb、ChlT含量略有升高,但三者的变化幅度均较小(图 2)。
2.3 盐分胁迫对中国柽柳扦插幼苗超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响随着土壤含盐量的升高,柽柳幼苗叶片内SOD活性呈先升高后降低趋势(图 3)。在土壤含盐量为0.4%下,柽柳幼苗叶片内SOD活性相比CK增加86.0%,但差异不显著(P>0.05)。在土壤含盐量0.8%下,叶片内SOD活性大幅度升高,相对CK增加了215.4%,显著高于含盐量0.4%和CK(P<0.05)。在土壤含盐量1.2%下,柽柳扦插幼苗叶片内SOD活性显著低于含盐量0.8%,但显著高于CK(P<0.05)。在土壤含盐量1.6%下,SOD活性又显著升高(P<0.05),达最大值,与CK相比增加了319.5%。随盐胁迫逐渐增强,在含盐量为2.0%时柽柳叶片内的SOD活性显著降低,但仍显著高于CK(P<0.05)(图 3)。
2.4 盐分胁迫对中国柽柳扦插幼苗过氧化物酶(POD)活性的影响随土壤含盐量的升高,柽柳幼苗叶片内的POD活性呈先升高后降低趋势(图 4)。在土壤含盐量0.4%下,柽柳幼苗叶片内POD活性与CK相比增加幅度较小,差异不显著(P>0.05)。在土壤含盐量0.8%下,柽柳幼苗叶片内POD活性显著升高,与CK相比增加了69.3%。当土壤含盐量升高到1.2%时,柽柳叶片内POD活性显著升高,达最高值,与CK相比增加了114.9%。随土壤含盐量的升高,在土壤含盐量为1.6%时,柽柳幼苗叶片POD活性开始降低,显著低于土壤含盐量1.2%时(P<0.05),显著高于CK(P<0.05)。当土壤含盐量升高到2.0%时,柽柳幼苗叶片内POD活性显著低于含盐量1.6%时,与CK相比差异不显著(图 4)。
2.5 盐分胁迫对中国柽柳扦插幼苗丙二醛(MDA)含量的影响随土壤含盐量的升高,柽柳幼苗叶片内MDA含量呈先升高后降低趋势(图 5)。在土壤含盐量0.4%下,柽柳幼苗叶片内MDA含量显著升高(P<0.05),与CK相比增加了39.7%。在土壤含盐量0.8%下,MDA含量略有升高,与CK相比较增加了42.5%。当土壤含盐量为1.2%时,柽柳叶片内MDA含量稍有下降,与CK差异不显著(P>0.05)。在含盐量为1.6%时,柽柳幼苗叶片MDA含量显著升高,达最大值,与CK相比增加77.8%(P<0.05)。随着土壤含盐量的进一步增加,柽柳幼苗叶片MDA含量开始显著降低,与CK差异不显著(P>0.05)(图 5)。
3 讨论柽柳的繁殖方式包括种子繁殖和扦插繁殖,而种子繁殖对温度和湿度的要求较高,且对于盐胁迫的耐受能力较低[23]。因此,扦插繁殖技术成为柽柳繁殖的主要方式。董兴红等[17]研究认为刚毛柽柳的适宜生长在含盐量不超过1.0%的土壤中,耐盐能力在2.5%左右。本研究表明中国柽柳扦插成活率受盐胁迫影响显著,在低盐条件下,中国柽柳扦插穗成活率较高,说明中国柽柳能够适应一定程度的盐胁迫,具有一定的耐盐能力。而在高盐条件下,中国柽柳扦插穗由于受到盐胁迫的抑制成活率较低。因此,中国柽柳适宜在不超过0.8%含盐量的土壤中进行扦插繁殖,而超过0.8%的含盐量时,柽柳扦插穗受到盐胁迫的影响,扦插成活率显著降低,其耐盐能力在2.0%左右。
叶绿素是植物进行光合作用的重要物质,叶绿素含量的多少对植物光合作用有着重要影响,其含量在一定程度上能反映植物同化物质的能力[24]。在土壤盐胁迫下,植物叶片内的叶绿体会遭到破坏,抑制叶绿素的合成或者促进叶绿素的分解[25]。刘会超等[26]研究发现白三叶叶绿素含量随盐胁迫的增强先升高后降低,认为盐胁迫会破坏植物细胞色素系统,导致叶绿素含量降低。在本研究中,中国柽柳扦插幼苗叶片内Chla、Chlb、ChlT含量在土壤含盐量0.4%下出现显著降低,可能是由于低盐条件下有利于中国柽柳生长,没能激活中国柽柳对盐胁迫的抵抗机制。随着盐胁迫增强,叶绿素含量开始增加,说明中国柽柳开始受到盐胁迫的影响,通过提高叶绿素的合成,来增强叶片的光合作用以适应盐胁迫。而在高盐胁迫下,叶绿素含量降低,表明中国柽柳受到盐胁迫的负面影响增强,对叶绿素合成系统造成了一定破坏,同时盐胁迫促进了叶绿素酶对叶绿素的分解[26],导致叶绿素含量降低。
抗氧化酶系统在清除或降低活性氧产生及缓解活性氧积累对植物造成伤害方面起重要作用。SOD是植物盐胁迫下主要的抗氧化物酶之一,在清除超氧离子、抵御膜脂的过氧化、减轻质膜受损等方面起着重要作用。在正常条件下,细胞内活性氧的产生和清除处于动态平衡状态,当植物受逆境胁迫时,这种平衡被打破,活性氧开始积累,植物通过提高SOD活性来清除多余的活性氧[27]。彭立新等[28]研究发现,植物细胞在盐胁迫下所能忍受的活性氧水平存在一个阈值,在阈值内,植物能够通过提高抗氧化酶活性来清除活性氧自由基,当超过这个阈值时,抗氧化酶活性便会受到抑制,活性氧过多积累,对植物组织造成伤害。在本研究中,随着盐胁迫的增强,柽柳幼苗叶片内SOD活性先升高后降低(图 3),表明土壤含盐量在低于1.6%的条件下,柽柳幼苗能够通过提高SOD活性来清除细胞内多余的活性氧自由基;而当含盐量超过1.6%以后,活性氧自由基的产生量超过了SOD的清除量,使得细胞受到损伤,SOD活性受到抑制。这与宋福南[27]等对柽柳SOD的研究结果相一致。
POD也是植物细胞内主要的抗氧化物酶,与SOD联合清除活性氧自由基,SOD将氧化过程中产生的活性氧自由基歧化反应形成O2和H2O2,然后由POD将产生的H2O2分解去除[29]。Lucrezia等[30]认为植物在盐胁迫下会通过提高POD活性来减少胁迫造成的伤害,而导致POD活性的提高的原因不仅来自活性氧的产生,还包括细胞膜的损伤以及Ca2+浓度的变化。在本研究中,在轻度盐胁迫下,POD活性升高不明显,柽柳幼苗受到盐胁迫影响不明显;随着盐胁迫的不断增强,含盐量在0.8%—1.2%之间时,POD活性开始显著升高,表明在该盐分范围内细胞产生的活性开始增加,抗氧化酶系统通过提高POD活性来分解SOD歧化产生的H2O2;而在高盐胁迫下,由于细胞内部产生过多的活性氧,超过了POD的清除阈值,使得多余的活性氧对酶系统造成一定破坏,造成POD活性降低,这与刘克东等[18]对甘蒙柽柳进行盐胁迫处理的结果相一致。
植物在逆境条件下,由于膜脂过氧化作用产生MDA,它是植物细胞膜受损和自由基形成的主要指示物[31]。对盐分耐受能力程度不同的植物,MDA含量变化规律不同:耐受能力弱的植物,随着盐胁迫增强叶片中MDA含量不断升高[32];而对盐分耐受能力较强的植物则随着盐胁迫的增强植物叶片内MDA含量先降低后升高[33]。廖宝文等[33]等研究发现,尖瓣海莲MDA含量在低盐胁迫下变化不显著,而在高盐胁迫下含量显著升高。在本研究中,在各个盐分胁迫下,中国柽柳叶片内MDA含量均高于CK。土壤含盐量在0.4%—1.2%范围时,MDA含量虽高于CK,但各个盐分胁迫之间差异不显著,可见在该盐度范围内中国柽柳受到膜脂过氧化作用影响较小。在含盐量为1.6%时,MDA含量显著升高,柽柳叶片细胞受到膜脂过氧化作用逐渐加强。但在土壤含盐量为2.0%时,MDA含量出现降低的现象,这可能与抗氧化酶系统的调节有关。
4 结论(1)在CK下,中国柽柳扦插成活率为100%;中国柽柳适合在不高于0.8%的盐分下进行扦插繁殖,当超过0.8%以后,随盐胁迫的增强,中国柽柳扦插成活率显著降低,当含盐量超过2.0%时,中国柽柳扦插难以成活。
(2)在适度盐分胁迫下,中国柽柳扦插幼苗可通过叶绿素含量提高增强自身光合作用以适应盐胁迫,但盐分胁迫过强时,叶绿素合成受到破坏,叶绿素含量降低。
(3)在盐分胁迫下,柽柳扦插幼苗通过提高SOD和POD活性清除多余的活性氧自由基,减少膜脂过氧化作用对细胞造成的伤害,但活性氧自由基过多积累时,使酶系统受到损伤,抗氧化酶活性降低。
(4)在低盐条件下,中国柽柳受到由盐胁迫引起的膜脂过氧化作用的影响较小,柽柳幼苗叶片内MDA含量变化不显著,但随着盐胁迫的增强,柽柳幼苗细胞膜受膜脂过氧化作用的伤害越来越严重,MDA积累就越多。
致谢: 感谢滨州学院黄河三角洲生态环境研究中心的各位老师给予的帮助。
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